(Flow cytometry , FCM ) သည် စွန်းထင်းနေသောဆဲလ်အမှတ်အသားများ၏ fluorescence intensity ကိုတိုင်းတာသောဆဲလ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် ဆဲလ်တစ်ခုတည်းကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းနှင့် အမျိုးအစားခွဲခြင်းအပေါ် အခြေခံ၍ တီထွင်ထားသော နည်းပညာမြင့်နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် အရွယ်အစား၊ အတွင်းပိုင်းဖွဲ့စည်းပုံ၊ DNA၊ RNA၊ ပရိုတင်းများ၊ အန်တီဂျင်များနှင့် ဆဲလ်များ၏ ရုပ်ပိုင်းဆိုင်ရာ သို့မဟုတ် ဓာတုဂုဏ်သတ္တိများကို လျင်မြန်စွာ တိုင်းတာနိုင်ပြီး ဤအမျိုးအစားများ စုစည်းမှုအပေါ် အခြေခံနိုင်သည်။
Flow cytometer တွင် အဓိကအားဖြင့် အောက်ပါ အစိတ်အပိုင်းငါးခု ပါဝင်ပါသည်။
1 Flow chamber နှင့် fluidics စနစ်
2 လေဆာအလင်းရင်းမြစ်နှင့် အလင်းတန်းပုံဖော်ခြင်းစနစ်
3 Optical စနစ်
4 အီလက်ထရွန်နစ်ပစ္စည်း၊ သိုလှောင်မှု၊ ပြသမှုနှင့်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုစနစ်
5 ဆဲလ်စီခြင်းစနစ်
၎င်းတို့အနက်၊ လေဆာအလင်းရင်းမြစ်နှင့် အလင်းဖွဲ့စည်းမှုစနစ်ရှိ လေဆာစိတ်လှုပ်ရှားမှုသည် flow cytometry တွင် fluorescence အချက်ပြမှုများကို အဓိက တိုင်းတာခြင်းဖြစ်သည်။ လှုံ့ဆော်မှုအလင်း၏ ပြင်းထန်မှုနှင့် ထိတွေ့မှုအချိန်တို့သည် မီးချောင်းအချက်ပြမှု၏ ပြင်းထန်မှုနှင့် ဆက်စပ်နေသည်။ လေဆာသည် လှိုင်းအလျားတစ်ခုတည်း၊ ပြင်းထန်မှုနှင့် တည်ငြိမ်မြင့်မားသောအလင်းရောင်ကို ပေးစွမ်းနိုင်သော ပေါင်းစပ်အလင်းအရင်းအမြစ်တစ်ခုဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် ဤလိုအပ်ချက်များကိုဖြည့်ဆည်းရန် စံပြစိတ်လှုပ်ရှားမှုအလင်းရောင်အရင်းအမြစ်ဖြစ်သည်။
လေဆာရင်းမြစ်နှင့် စီးဆင်းခန်းကြားတွင် ဆလင်ဒါမှန်ဘီလူး နှစ်ခုရှိသည်။ ဤမှန်ဘီလူးများသည် လေဆာရင်းမြစ်မှ ထုတ်လွှတ်သော စက်ဝိုင်းပုံဖြတ်ပိုင်းရှိသော လေဆာရောင်ခြည်ကို သေးငယ်သောဖြတ်ပိုင်း (22 μm × 66 μm) ရှိသော ဘဲဥပုံအလင်းတန်းတစ်ခုသို့ အာရုံစူးစိုက်သည်။ ဤ elliptical beam အတွင်းရှိ လေဆာစွမ်းအင်ကို သာမာန်ဖြန့်ဖြူးမှုအရ ဖြန့်ဝေပြီး လေဆာရှာဖွေတွေ့ရှိသည့်နေရာကိုဖြတ်သွားသောဆဲလ်များအတွက် တသမတ်တည်း တောက်ပမှုပြင်းထန်မှုကို သေချာစေသည်။ အခြားတစ်ဖက်တွင်၊ optical စနစ်တွင် မှန်ဘီလူးအစုံ၊ အပေါက်များ၊ နှင့် filter များပါ၀င်ပြီး အကြမ်းဖျင်းအားဖြင့် အုပ်စုနှစ်စုခွဲနိုင်သည်- flow chamber ၏ အထက်ပိုင်းနှင့် အောက်ပိုင်း။
flow chamber ၏ရှေ့ရှိ optical system တွင် lens နှင့် pinhole ပါဝင်သည်။ မှန်ဘီလူးနှင့် pinhole ၏ အဓိကလုပ်ဆောင်ချက် (များသောအားဖြင့် မှန်ဘီလူးနှစ်ခုနှင့် ပေါက်ပေါက်တစ်ခု) သည် လေဆာရင်းမြစ်မှ ထုတ်လွှတ်သော စက်ဝိုင်းပုံဖြတ်ပိုင်းဖြင့် လေဆာရောင်ခြည်ကို သေးငယ်သည့် ဘဲဥပုံအကန့်အဖြစ်သို့ အာရုံစိုက်ရန်ဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် လေဆာရှာဖွေခြင်းဧရိယာတစ်လျှောက်ရှိ ဆဲလ်များအတွက် တစ်သမတ်တည်း အလင်းရောင်ပြင်းအားကို သေချာစေကာ ပုံမှန်ဖြန့်ဖြူးမှုအတိုင်း လေဆာစွမ်းအင်ကို ဖြန့်ဝေပေးကာ လေလွင့်အလင်းရောင်မှ အနှောင့်အယှက်များကို လျှော့ချပေးသည်။
Filter အမျိုးအစားသုံးမျိုးရှိသည်။
1- Long pass filter (LPF) - သတ်မှတ်ထားသောတန်ဖိုးထက် လှိုင်းအလျားပိုမြင့်သော အလင်းများကိုသာ ဖြတ်သန်းခွင့်ပြုသည်။
2- Short-pass filter (SPF) - သတ်မှတ်ထားသောတန်ဖိုးအောက်ရှိ လှိုင်းအလျားရှိသော အလင်းများကိုသာ ဖြတ်သန်းခွင့်ပြုသည်။
3- Bandpass filter (BPF) - သတ်မှတ်ထားသော လှိုင်းအလျားအကွာအဝေးရှိ အလင်းများကိုသာ ဖြတ်သန်းခွင့်ပြုသည်။
မတူညီသော filter များ၏ပေါင်းစပ်မှုများသည် မတူညီသောလှိုင်းအလျားများတွင် fluorescence အချက်ပြမှုများကို တစ်ဦးချင်းစီ photomultiplier tubes (PMTs) သို့ တိုက်ရိုက်ညွှန်ကြားနိုင်သည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ PMT ၏ရှေ့ရှိ အစိမ်းရောင်မီးချောင်း (FITC) ကိုသိရှိရန်အတွက် စစ်ထုတ်မှုများမှာ LPF550 နှင့် BPF525 ဖြစ်သည်။ PMT ၏ရှေ့ရှိ လိမ္မော်ရောင်မီးချောင်း (PE) ကိုသိရှိရန်အသုံးပြုသော filter များသည် LPF600 နှင့် BPF575 ဖြစ်သည်။ PMT ၏ ရှေ့ရှိ အနီရောင် fluorescence (CY5) ကို ထောက်လှမ်းရန်အတွက် စစ်ထုတ်မှုများမှာ LPF650 နှင့် BPF675 ဖြစ်သည်။
Flow cytometry ကို ဆဲလ်ခွဲခြင်းအတွက် အဓိကအသုံးပြုသည်။ ကွန်ပြူတာနည်းပညာ တိုးတက်လာသည်နှင့်အမျှ ကိုယ်ခံစွမ်းအားဆိုင်ရာ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုနှင့် monoclonal antibody နည်းပညာကို တီထွင်မှုနှင့်အတူ ဇီဝဗေဒ၊ ဆေးပညာ၊ ဆေးဆိုင်နှင့် အခြားနယ်ပယ်များတွင် ၎င်း၏အသုံးချမှုများသည် ပိုမိုကျယ်ပြန့်လာပါသည်။ ဤအပလီကေးရှင်းများတွင် ဆဲလ်ဒိုင်းနမစ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၊ ဆဲလ် apoptosis၊ ဆဲလ်စာရိုက်ခြင်း၊ အကျိတ်ရောဂါရှာဖွေခြင်း၊ ဆေးဝါးထိရောက်မှု ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းစသည်ဖြင့် ပါဝင်သည်။
တင်ချိန်- စက်တင်ဘာ ၂၁-၂၀၂၃
